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《动物生物化学》实验

课程编号: 02002008

课程名称: 动物生物化学实验( Animal Biochemistry Experiment)

学时学分:课程总学时64,实验总学时16,课程总学分4

先修课程:有机化学、无机化学、分析化学、普通生物学等。

适用专业:动物科学、动物医学

一、课程性质和任务

生物化学实验是生化教学重要的组成部分。生化实验技术广泛用于生命科学许多领域研究。通过实验课的教学,使学生掌握比色、层析、电泳、离心等生物化学基本实验方法的原理和操作技能,学会选择正确的方法进行生物材料中多种物质的分离、提纯及鉴定,培养学生严谨的科学态度和分析、解决问题的能力。同时通过实验加深学生对生物化学基本理论的理解。根据实际情况选择8个实验,学时数为16学时。

二、教学目标及要求

本课程教学是以培养学生具有较扎实的生物化学理论基础和较强的实验技能,努力提高学生的独立工作能力、创新思维能力以及发现问题、分析问题和解决问题的能力为总体目标。

要求学生熟练地掌握从事生物化学研究的基本理论知识和实验技能以及常用实验仪器的使用、维修和保养方法。进一步提高学生的综合运用技能,为《动物生理学》、《病理学》、《普通兽医学》、《动物繁殖学》、《家畜传染病学》等后续专业课程奠定基础。

三、实验内容与学时分配

序号

项目名称

实验目的与内容

学时

实验性质

主要试材及仪器设备

1

基本理论和基本训练

掌握生物化学实验基本实验技术的原理;

掌握离心机、分光光度计的使用;

掌握各种刻度吸量管的使用。

了解试管的清洗方法。

2

基础必修

离心机、分光光度计、各种刻度吸量管、试管等

2

酶的特异性、温度、pH对酶活性的影响

掌握酶特异性的基本概念;

掌握温度、pH对酶活性的影响;

掌握酶学实验必须注意控制的条件。

熟悉酶特异性实验的设计。了解抑制剂对酶活性的影响。

3

基础必修

试剂:淀粉溶液、碘化钾-碘溶液、尿素溶液等。

器材:比色盘,试管,水浴锅等。

3

肝糖原的提取和鉴定

掌握糖定性和定量的检测方法。

熟悉肝糖原提取时,加入三氯醋酸、乙醇的作用

2

基础必修

试剂:三氯醋酸、95%乙醇、碘液等。器材:乳钵,离心机,试管,玻璃棒等。

4

Vc的测定

掌握利用维生素C有很强的还原性的特点,用2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C的含量

2

基础必修

试剂:维生素C标准液,中性甲醛溶液,醋酸缓冲液,碘化钾溶液等。

器材:试管,微量滴定管,研钵等。

5

血清总脂的测定——香草醛法

利用血清中的不饱和脂类与浓硫酸作用水解成正碳离子,生产红色的醌化合物的原理,用分光光度法测定测定血清总脂的含量。

3

基础必修

试剂:胆固醇标准液,显色剂,浓硫酸,浓磷酸等。

器材:试管,分光光度计等。

6

血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳

掌握电泳的原理和影响电泳的因素。

熟悉醋酸纤维素薄膜电泳的基本操作过程

了解醋酸纤维素薄膜电泳定蛋白质含量的方法。

3

基础必修

试剂:新鲜血清,染色液,漂洗液,冰醋酸等。

器材:醋酸纤维薄膜,电泳槽,纱布,电泳仪等。

7

用纸层析法鉴定转氨酶的转氨基作用

掌握分配层析的基本原理、谷丙转氨酶的辅酶、体内氨基酸脱氨基作用的方式。

熟悉谷丙转氨酶和谷草转氨酶的临床意义。

4

基础必修

试剂:磷酸缓冲液,L-丙氨酸,层析溶剂,α-酮戊二酸等。

器材:乳钵,烧杯,培养皿,滤纸,电热鼓风干燥箱等。

8

SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子量

掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理。

熟悉电泳时加入SDS、溴酚蓝的作用。

了解其它测定蛋白质相对分子量的方法。

6

基础必修

试剂:Tris缓冲液,0.03%溴酚蓝溶液,TEMED,Acr, Bis 等。

器材:冰箱,滤纸,电泳设备,照相设备等。

9

牛乳中蛋白质的提取与鉴定

掌握蛋白质在等电点时的特性

学会调节溶液的PH

应用蛋白质等电点的特点提取酪蛋白

2

基础必修

试剂:醋酸钠缓冲液,米伦试剂,乙醚,95%乙醇等。

器材:试管,烧杯,纱布,布氏漏斗等。

10

真核生物基因组DNA的制备

掌握基因组DNA提取的基本原理。

熟悉提取核酸的注意事项。

4

基础必修

试剂:钼酸铵试剂,氨基萘酚磺酸,二苯胺试剂等。

器材:研钵,试管,离心机,烧杯等。

11

实验技能考试

内容:实验理论考试(笔试方式)

实验操作考核(自己动手)

2

基础必修

各种实验器材及药品都准备好,学生根据实验所需自行选择。

备注:任课教师应该根据实际情况在上述实验当中选做6—10个实验。

四、教学方式及课程考核办法

教学方式:

本实验课的教学方式在组织及安排上与传统的教学模式没有太大的区别,即在一边上理论课一边做实验。实验中采用集体讲授、演示与个别指导相结合。学生分小组独立、合作完成实验任务。实验的原理、意义结合理论内容以教师讲授为主,实验的操作部分以学生自己动手实验为主。实验结束后要求学生完成实验报告。

考核办法:

一般是根据学生现场实验操作和实验报告及期末综合技能测试三部分完成,平时实验成绩占50%,综合实验成绩占50%。实验成绩占学科总成绩的20%。
五、教材及主要参考书目

教材:

《生物化学实验指导》 学校自编教材 2006年

参考书:

《生物化学》(第三版),上下册 王镜岩等主编 高等教育出版社 2002年

《动物生物化学》 周顺伍 主编 中国林业出版社 2006年

《生物化学实验方法和技术》 张龙翔 张庭芳等主编 高等教育出版社 1996年

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